植物硝態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC1505
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前根據(jù)用量每支加入0.5 mL濃硫酸充分溶解。配制好后盡快使用，4℃可保存一周。

2. 標準品：10 mg硝 酸鉀，臨用前加入0.935 mL蒸餾水溶解，配成1400 μg/mL的NO₃-N標準液。

產(chǎn)品說明：
硝酸鹽是植物吸收的主要含氮物質(zhì)之一。硝酸鹽在植物體內(nèi)的還原部位不同，可以在根內(nèi)，也可以在枝葉內(nèi)進行，且因植物類別和環(huán)境條件而異。因此，測定植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量變化對了解氮代謝機制有重要的意義。
在濃酸條件下，NO₃^-可以與水楊酸反應，生成硝基水楊酸，后者在PH>12的條件下呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計算得硝態(tài)氮含量。
技術(shù)指標：
低檢出限：0.4631 μg/mL
線性范圍：3.5-140 μg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、濃硫酸、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：

1. 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性，操作時需做好防護措施。

2. 如果樣本吸光值大于1.5，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g蘋果加入1mL蒸餾水進行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA=A測定-A對照=0.333-0.051=0.282，ΔA標準管=A標準管-A空白管=0.320-0.048=0.272，按樣本質(zhì)量計算含量得：

NO₃^-N含量（μg/g質(zhì)量）=28×ΔA÷ΔA標準÷W=28×0.282÷0.272÷0.1=290.3 μg/g質(zhì)量。

1. 取0.1g葉片加入1mL蒸餾水進行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA= A測定-A對照=0.633-0.458=0.175，ΔA標準管=A標準管-A空白管=0.320-0.048=0.272，按樣本質(zhì)量計算含量得：

NO₃^-N含量（μg/g質(zhì)量）=28×ΔA÷ΔA標準÷W=28×0.175÷0.272÷0.1=180.1 μg/g質(zhì)量。
相關發(fā)表文獻：
[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018;(IF3.537)
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