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幾丁質酶活性檢測試劑盒 微量法
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
幾丁質酶活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位

英文名稱
Chitinase Activity Assay Kit
別名
幾丁質酶測定試劑盒 幾丁質酶測定測試
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規格
100T/48S

產品型號:BC0825-100T/48S

更新時間:2025-08-26

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1233

服務熱線

010-50973130

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產品介紹

幾丁質酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC0825
規格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一液體8mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體9 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體3mL×1瓶2-8℃保存
試劑四A粉劑×22-8℃保存
試劑四B液體50mL×1瓶2-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:此試劑為懸濁液,使用前需搖勻;

  2. 試劑三:此試劑為飽和溶液,低溫(2-8℃)條件取出會有晶體析出,60℃加熱使其溶解即可;

  3. 試劑四:臨用前取一瓶試劑四A,加入21mL試劑四B中,充分溶解,現用現配。用不完的試劑2-8℃可以保存4(試劑四B若有結晶可37℃促進溶解);

  4. 標準品:5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入 1mL 試劑一配制成 5mg/mL 的標準溶液,即5000μg/mL的標準溶液,2-8℃可以保存4 周。

產品說明:
幾丁質酶主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產生的中間化合物可進一步與對二甲氨 基 苯甲醛反應產生顯色物質,該顯色物質在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。



注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。


操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件

注意事項:
  1. 反應結束后盡快進行比色。

  2. 吸光值大于1.5或者ΔA大于1時,樣本用提取液適當稀釋再測定或者縮短37℃酶促反應時間,注意同步修改計算公式。若ΔA小于0.01時,可以延長第一步37℃反應時間或者加大樣本的加入量,注意修改計算公式。

實驗實例:
  1. 取0.111g蝦殼加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,96孔板測定吸光度并計算ΔA=A測定-A對照=0.531-0.054=0.477,帶入標曲y=0.007x+0.0205,得出x=65.214μg/mL,按樣本質量計算酶活得:

幾丁質酶活性(U/g 質量)=2.5×x÷W=1468.790U/g 質量。
  1. 取0.113g平菇加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后按照測定步驟操作,96孔板測定吸光度并計算ΔA=A測定-A對照=0.754-0.055=0.699,帶入標曲y=0.007x+0.0205,得出x=96.929 μg/mL,按樣本質量計算酶活得:

幾丁質酶活性(U/g 質量)=2.5×x÷W=2144.437 U/g 質量。
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幾丁質酶活性檢測試劑盒 微量法 幾丁質酶活性檢測試劑盒 微量法


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