土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC3995
規格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：甲苯自備；

2. 試劑三：臨用前取1瓶加入5mL蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑-20℃分裝保存一周，避免反復凍融；

3. 標準品：5mmol/L的對硝基 苯*溶液。臨用前用試劑二將標準品稀釋50倍得100μmol/L的標準溶液。（具體稀釋過程見操作步驟）

產品說明：
土壤芳基硫酸酯酶來自于土壤微生物，能酶促土壤有機硫化物轉化為植物可吸收的無機態硫，在硫素的生物化學循環和植物的硫營養代謝中具有重要的作用，是反映土壤質量的一個重要生物學指標。

1. ASF能夠催化對-硝基 苯硫酸鉀生成對-硝基 苯*，后者在410nm有特征光吸收。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、恒溫水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、研缽、冰、30-50目篩、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件

三、S-ASF活力計算
單位的定義：每天每g土樣中產生1μmol對-硝基 苯*定義為一個酶活力單位。
S-ASF活力（U/g 土樣）=ΔA測定÷ (ΔA標準÷C標準)×V反總÷W÷T =0.456×ΔA測定÷ΔA標準÷W
T：反應時間，1h=1/24d；V反總：反應體系總體積：1.9×10^-4L；C標準：標準溶液濃度，100μmol/L；W：樣本質量，g。
實驗實例：

1. 分別稱取兩管0.02g三葉草土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.401-0.076=0.325，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.395-0.047=0.348，計算酶活得：

S-ASF活力（U/g 土樣）=0.456×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.456× 0.325÷0.348÷0.02=21.293 U/g 土樣。

1. 分別稱取兩管0.02g土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.262-0.066=0.196，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.395-0.047=0.348，計算酶活得：

S-ASF活力（U/g 土樣）=0.456×ΔA測定÷ΔA標準÷W=0.456× 0.196÷0.348÷0.02=12.841 U/g 土樣。
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