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直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法
產品簡介:

儲存條件
2-8℃
中文名稱
直鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位

英文名稱
Amylose Content Assay Kit
檢測方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規格
100T/96S
自備試劑
該試劑盒實驗過程中需自備試劑,詳情見網站說明書

產品型號:BC4265-100T/96S

更新時間:2024-04-15

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1223

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產品介紹


直鏈淀粉含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC4265
規格:100T/96S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱規格保存條件
試劑一液體110 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體100 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑三液體55 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四-2-8℃保存
試劑五液體0.5 mL×1支2-8℃保存
試劑六液體10mL×1支2-8℃保存
標準品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑二:*100 mL自備;

  2. 試劑四:提供125 mL空瓶一個;將試劑三:H2O =9 mL:91 mL混勻,現用現配,2-8保存半年;

  3. 標準品:10 mg直鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三,混勻后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直鏈淀粉,2-8℃保存半年。

產品說明:
直鏈淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷鍵鏈接的多糖鏈,直鏈淀粉含量影響著食品的食用品質和外觀品質,與食品安全息息相關。
直鏈淀粉和碘形成藍色絡合物,利用乙醇分開樣本中的可溶性糖和淀粉,再用碘與其反應得到直鏈淀粉含量。

技術指標:
低檢出限:0.0019 mg/mL
線性范圍:0.025-0.8 mg/mL
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、天平、臺式離心機、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、*、無水乙醇、EP管、蒸餾水。
操作步驟:
  • 樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻

  1. 稱取0.01g烘干樣本加入1mL試劑一,充分勻漿

  2. 80℃水浴提取30min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  3. 在步驟2沉淀中加入1mL試劑二(*)振蕩 5min3000g,25℃離心5min,棄上清,留沉淀

  4. 在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g25℃離心5min,取上清待測。

二、測定步驟
  1. 分光光度計/酶標儀預熱30min以上,調節雙波長至550nm485nm,分光光度計蒸餾水調零。

  2. 標準溶液的稀釋:取40μL 10mg/mL標準溶液,加入960μL試劑四,充分混勻,配制成0.4mg/mL標準溶液使用,現用現配。(實驗中每管需要20μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)

  3. 操作表 (在1.5mL離心管或96孔板中依次加入下列試劑)

試劑名稱測定管標準管空白管
樣本(µL)20--
標準溶液(μL-20-
蒸餾水(µL)--20
試劑五(µL)444
試劑六(µL)444
蒸餾水(µL)172172172
充分混勻,測定550nm和485nm處的吸光值,550nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白,485nm下的分別記為A’測定、A’標準和A’空白,計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白),ΔA標準=A標準-A空白)-A’標準-A’空白)。標準管和空白管只需測1-2次。
三、直鏈淀粉含量計算
直鏈淀粉含量(mg/g質量)=ΔA測定÷ΔA標準÷C標準)×V樣總÷W=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W
C標準:標準溶液濃度,0.4mg/mLV樣總:加入試劑四體積,5mLW:樣本質量,g
注意事項:
  1. 反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。

  2. 若A測定大于0.95,建議樣本上清用試劑四稀釋后再進行測定;若A測定低于0.07時,可以提取時減少試劑四體積進行測定。注意同步修改計算公式。

實驗實例:
  1. 取0.01g烘干玉米于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉移到 EP 管中,80℃水浴提取30min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(*)振蕩5min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入5mL試劑四充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后3000g25℃離心5min,取上清,之后按照測定步驟操作,使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A空白)-A’測定-A’空白)=0.395-0.047-0.283-0.058=0.123ΔA標準=A標準-A空白)-A’標準-A’空白)=0.517-0.047-0.317-0.058=0.211,按樣本質量計算含量得:直鏈淀粉含量(mg/g 質量)=2×ΔA測定÷ΔA標準÷W=116.59 mg/g 質量。

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