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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-常量法輔酶Ⅰ系列BC0650-50T/48S單脫氫抗壞血酸還原酶測試盒 輔酶系

單脫氫抗壞血酸還原酶測試盒 輔酶系
產品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
單脫氫抗壞血酸還原酶測試盒 輔酶系
有效期
6個月
單位

英文名稱
Monodehydroascorbate Reductase(MDHAR) Activity Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S

產品型號:BC0650-50T/48S

更新時間:2024-04-24

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1614

服務熱線

010-50973130

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產品介紹

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號:BC0650
規(guī)格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體60 mL×1瓶2-8℃保存
試劑液體30mL×1瓶2-8℃保存
試劑粉劑×12-8℃保存
試劑粉劑×1-20保存
試劑液體×1-20保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解,2-8℃保存;

  2. 試劑三:臨用前加入5 mL蒸餾水充分溶解,可溶解后分裝-20℃保存,避免反復凍融;

  3. 試劑四:液體置于試劑瓶內EP管中。臨用前加5 mL試劑一充分溶解,可溶解后分裝-20℃保存,避免反復凍融。

產品說明:
MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。
MDHAR催化NADH還原MDHA生成AsANAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算出MDHAR活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器用品:
研缽/勻漿器、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調式移液槍和雙蒸水。
操作步驟:“具體操作步驟詳見“產品資料"附件"
注意事項:
ΔA測定大于0.3時,建議客戶稀釋樣本或者調整試劑一和上清液的比例(如將400μL試劑一+300μL上清液改為600μL試劑一+100μL上清液)后進行測定。
ΔA測定過小時,建議客戶提高樣本量或者調整試劑一和上清液的比例(如將400μL試劑一+300μL上清液改為200μL試劑一+500μL上清液)。
A1大于1.5時,建議將樣本稀釋進行測定。
空白管為檢測各管試劑組份的檢測孔,正常情況下,其OD值在0.5左右,變化不超過0.01。
由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以在測定樣品蛋白濃度時需要減去提取液本身的蛋白含量。

實驗實例:

  1. 取0.1g橙子果肉加入1mL提取液進行冰浴勻漿。10000rpm,4℃離心10min,取上清置冰上,按照測定步驟操作,測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=0.827-0.8=0.027,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.536-0.532=0.004,按樣本質量計算酶活得:

MDHAR 活性(U/g 質量) =0.268×(ΔA測定管-ΔA空白管) ÷W=0.268×(0.027-0.004) ÷0.1=0.06164U/g 質量。
相關發(fā)表文獻:

  1. Yali Zhou,Sufang Huo,Liting Wang,et al. Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings. Plant Physiology and Biochemistry. September 2018;(IF3.404)

相關系列產品:
BC1230/BC1235 抗壞血酸(AsA)含量檢測試劑盒
BC1240/BC1245 脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測試劑盒

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