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產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法蛋白含量測(cè)定系列BC5650-50T/48S尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào)：BC5650-50T/48S
更新時(shí)間：2024-04-23
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問(wèn) 量 ：1273
010-50973130
產(chǎn)品分類(lèi)
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尿蛋白含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)（麗春紅比色法）
可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào)：BC565
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱(chēng) | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1 mL×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一工作液：臨用前根據(jù)樣本數(shù)量按照試劑一：蒸餾水=0.25mL：2.25mL（2.5mL，1T）的比例配制試劑一工作液；
2、 標(biāo)準(zhǔn)品：5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液。臨用前取80μL 5mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液，加入920μL蒸餾水，配制成0.4 mg/mL BSA標(biāo)準(zhǔn)液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
產(chǎn)品說(shuō)明：
尿液中蛋白含量增加，表明腎臟系統(tǒng)的重吸收作用減弱，通常可作為腎臟疾病臨床診斷的輔助依據(jù)。
在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅染料，離心得到的蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物可溶解于堿性溶液，檢測(cè)其在560nm處的吸光值可計(jì)算得到樣本蛋白含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、5mL EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理
1. 尿液等液體樣本：直接測(cè)定。若有渾濁請(qǐng)離心后取上清置于冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1．可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至560nm，蒸餾水調(diào)零。
2．操作表：
充分混勻，3500rpm常溫離心10min，棄全部上清，留全部沉淀。 | |||
試劑二 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
震蕩充分溶解沉淀，于560nm處測(cè)定各管吸光值，分別記為A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白，計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A空白，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)1-2次。 | |||
三、尿蛋白含量計(jì)算
尿蛋白含量（mg/mL）= ΔA測(cè)定×（C標(biāo)÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)）×V樣÷V樣= 0.4×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)
C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.4mg/mL；V樣：加入樣本體積，1mL。
注意事項(xiàng)：
1、 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中離心步驟結(jié)束后，上清液需要全部除去，同時(shí)不可損失沉淀，否則會(huì)影響比色結(jié)果。
2、 如果?A測(cè)定小于0.004或測(cè)定管吸光值接近空白管，可以增加樣本量后再進(jìn)行測(cè)定；如果?A測(cè)定大于0.3，建議將樣本用蒸餾水適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
參考文獻(xiàn)：
[1] Michael A Pesce, Carl S Strande. A new micromethod for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clinical Biochemistry, 1973, 19(11): 1265-1267.
[2] Jean Dube, Joel Girouard, Pierre Leclerc. et al. Problems with the estimation of urine protein by automated assays[J]. Clinical Biochemistry, 2005, 38(5): 479-485.
[3] Pan Ya. An analysis about the quantitative measurement of urinary protein[J]. China Health Standard Management, 2014, 5(18): 125-126.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
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