總膽*素（TBIL）含量檢測(cè)試劑盒說明書

                                            微量法

貨號(hào)：BC5185

規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

產(chǎn)品說明：

總膽*素（Total bilirubin，TBil）是直接膽*素和間接膽*素的總和。血清總膽*素的測(cè)定是肝、膽功能檢查中的一項(xiàng)重要檢測(cè)項(xiàng)目。能準(zhǔn)確地反映黃疸的程度，對(duì)臨床診斷隱性黃疸有重要意義。在表面活性劑的存在下，總膽*素能被亞*鈉氧化，生成膽綠素。通過檢測(cè)450nm下波長(zhǎng)變化，可計(jì)算出總膽*素的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）

血清、血漿等液體樣本：直接測(cè)定。若有渾濁可以離心后取上清進(jìn)行測(cè)定。

二、測(cè)定步驟

1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2、 按下表步驟加樣（在EP管或者96孔板上加入下列試劑）：

三、TBIL含量計(jì)算

1、 計(jì)算公式

（1）使用96孔板：

TBIL含量（μmol/L）=874.67×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）+10.699

   （2）使用微量比色皿：

TBIL含量（μmol/L）=491.98×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）+18.478

注意事項(xiàng)：

1、膽*見光易分解，測(cè)定時(shí)要盡量避光。

2、控制ΔA測(cè)定在0.01-1.5之間，如果低于或者超過可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1、 取非正常小鼠血清按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A1測(cè)定-A2測(cè)定=0.271-0.148=0.13，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.051-0.048=0.003，計(jì)算含量得：

TBIL（μmol/L）= 874.67×（ΔA測(cè)定-ΔA空白）+10.699=121.78 μmol/L。

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